使用荧光显微成像系统的钙成像
钙成像分析
近年来,使用荧光显微镜进行钙成像(Ca成像)拍摄的研究者正在不断增加。
钙成像是一种测量钙在细胞内的流动情况,对活动中的神经元钙信号进行🥀直接观察的方法。被广泛运用在脑细胞研究等领域。
钙成像的原理
进行钙成像时,需要借助荧光显微镜或荧光平板分析仪进行观察。将一旦与钙离子结合,就会改变荧光强度的蛋白质或钙荧光指示剂导入细胞内部,根据荧光强度的变化,检测钙离子的浓度变化。
但是,由于钙荧光指示剂的荧光效果非常微弱,观察时必须辅以大功率的激光照射,可能会导致细胞死亡。因此,在绝大多数人眼中,顺利完成钙成像并非易🎃事。
钙成像的失败事例及对策
钙三维显像的不成功名人名人作文素材,实际上有些相似于荧光显微镜活細胞三维显像的不成功名人名人作文素材,細胞衰微、亮点不清楚、細胞逃出角度,哪些都应属于比较普遍的不成功名人名人作文素材。例如,如果对钙成像开始一段时间后的细胞状况进行观察,可能会发现细胞衰弱甚至死亡的现象。
其中的重要原因之一,就是高强度的激发光对细胞造成了损伤(光毒性)。
解决这一问题的对策如下所示。
- 请尽可能使用灵敏度高的相机
- 请并用增益或Binning
- 请采用能够感知微弱荧光的设定
- 请尽量调弱激发光
- 不进行拍摄时请切断激发光
在进行钙成像的过程中,有时还会发生焦点从中途就模糊的现象。这可能是因为温度漂移导致细胞移动,设定出错,抑或是细胞在分裂过程中上下移动,致使焦点偏移。许多实施荧光显微镜观察的研究者都经历过这样的情况。
作为对策,可以使用自动对焦功能或Z栈功能,预防焦点偏移的发生。
钙成像的观察事例
![成肌细胞的钙成像(CPA Fluor8 以5秒为间隔,拍摄10分钟)](/Images/ss_bz-casestudy_calcium-imaging_001_1878605.png)
![G CaMP 钙成像测试](/Images/ss_bz-casestudy_calcium-imaging_002_1878608.png)
![G CaMP 钙成像测试](/Images/ss_bz-casestudy_calcium-imaging_003_1878609.png)
![G CaMP 钙成像测试](/Images/ss_bz-casestudy_calcium-imaging_004_1878610.png)
![G CaMP 钙成像测试](/Images/ss_bz-casestudy_calcium-imaging_005_1878611.png)
![G CaMP 钙成像测试](/Images/ss_bz-casestudy_calcium-imaging_006_1878612.png)
![G CaMP 钙成像测试](/Images/ss_bz-casestudy_calcium-imaging_007_1878613.png)
![G CaMP 钙成像测试](/Images/ss_bz-casestudy_calcium-imaging_008_1878614.png)
![G CaMP 钙成像测试](/Images/ss_bz-casestudy_calcium-imaging_009_1878615.png)
![G CaMP 钙成像测试](/Images/ss_bz-casestudy_calcium-imaging_010_1878616.png)
假设吸引人才一起化荧光显微三维成像体统BZ-X800
- 无需暗室、操作简单,可非常清晰地进行显微镜观察。
- 利用由制冷相机和专用镜头构成的高灵敏度光学系统,能够在尽量减少细胞损伤的同时,获取高精细的荧光图像。
- 能够一次性对多个标本进行延时拍摄,便于开展相同条件下的比较检验。
什么是G CaMP?
一种由蛋白质构成的钙传感器。
运用基因工程技术,用绿色荧光蛋白、钙调素、肌球蛋白轻链片段拼接而成的钙传感器蛋白质。可以植入基因,使之与动🔯物模型的组织、细胞特异性启动子结合,起到仅对目标组织或细胞瘤实施钙成像处理的目的。
- 下面将为您介绍利用一体化荧光显微成像系统“BZ-X800”的先进研究事例
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