用Fucci进行口腔上皮细胞系（Ca 9-22）的细胞周期观察
基于延时拍摄成像的细胞周期观察事例
Fucci（Fluorescent Ubiquitination-based Cell Cycle Indicator）是一种能够对细胞周期进程进行实时有效监控的荧光探针。下列视频就是利用基恩士的一体化荧光显微成像系统BZ-X800，对已导入Fucci的口腔上皮细胞系（Ca 9-22）进行拍摄后得到的视频。期间以30分钟为间隔，进行了120次、共计60小时的延时拍摄成像。
利用多点拍摄功能，以30分钟为间隔，对6孔培养板的各培养孔，进行单次3点，共计18点的连续拍摄。
视频来源：
新潟大学医学部
基础医学系 显微解剖学（解剖学第3讲座）
三上刚和 先生
细胞周期观察中的问题点
要用活生殖细胞（Live cell）来长用时如何延时拍好成相的的时候中，必须要仍然提升固定的溫度、CO2有机废气浓度和内部含水率。避免上面相关毛病的比较简单方式，只是掐准拍好时间窗口，仅在拍好时将生物标本采集从温控箱中拿出，来拍好。只不过这个方式又会产生出“易于出现拍好地方”、“转动生物标本采集会转变其情况，会存在的污染高风险”、“很久拍好时就要来人工费系统维护”等更多相关毛病。
- A
- 台面式恒温箱
- B
- 温度及CO2控制器
一体机化荧光显微三维成相整体BZ-X800主要采用柜面式中大型温控箱，就可以在确保疟原虫场景节流过程的同時，开始指定的的次数的系统自动制作。还能运用多些因素制作工作，在变化功率、滤光片等制作因素的同時，开始多些制作，只需以非常简单操作步骤开始怎么延时制作三维成相，就能以超长的的效率，加速推动实践速度。
如吸引人才成数字化荧光显微三维成像软件系统BZ-X800
- 全电动控制，操作简单便捷。无需暗室，可以在台面上安装小型恒温箱，轻松实现活细胞成像。
- 利用由制冷相机和专用镜头构成的高灵敏度光学系统，能够在尽量减少细胞损伤的同时，获取高精细的荧光图像。
- 能够一次性对多个标本进行延时拍摄，便于开展相同条件下的比较检验。
什么是Fucci？
Fucci技术用发出红色荧光的mKO2（monomeric Kusabira-Orange2）荧光蛋白质，结合G1期（分裂结束后，细胞开始为DNA复制做准备的时期）增长量超大的Cdt1，再用发出绿色荧光的mAG（monomeric Azami-Green1）荧光蛋白质，与Geminin（在从DNA复制到细胞分裂前的S/G2/M期的增长量超大）相结合，就能实现细胞周期进程的可视化，对DNA复制及细胞分裂的情况进行实时观察。
自2008年开发以来，Fucci技术就在不断改良，陆续推出了对细胞核内及细胞整体进行Fucci信号标记的Fucci（N+C）；在荧光蛋白质中应用mCherry和mVenus，使G1期和S/G2/M期更易分离的Fucci2；还有追加细胞周期间💦期（G1、S、G2期）识别能力，借此辨识4种细胞周期的Fucci（CA）等等。如今，Fucci技术已经被广泛用于发生学、再生医学、癌肿瘤学等领域，研究与细胞周期息息相关的各类生命现象。
