球体及类器官的透明处理观察
什么是球体？
球体是指由细胞凝集而成的团块。
球体是通过3D培养将数千个细胞凝集而成的球形组织，与2D细胞培养相比，能长时间维持高功能表达。由于它会形成代谢梯度，因此会出现不均匀的细胞分布，细胞与细胞外基质（ECM：Extracellular Matrix）间或者细胞间会产生相互作用。此外，球体是神经组织、胚状体、肝细胞、肿瘤组织或乳腺来源细胞等多种细胞的聚集体。相对于2D细胞培养而言，它的结构更接近于生理学上的构造，因此可以在患病时高度再现多种组织的状态。
出于这些特性，球体广泛用🍬于评估药物有效性和毒性的筛查试验。另外，以治疗为目的将球体向患者移植的研究也正在进行，且在缺血性疾病及肝病治疗方面，球体的有效性已获认可。
什么是类器官？
类器官是指将球体进一步升级而具备脏器功能的细胞培养物。
真正的脏器因无法持续供应营养而无法培养。而类器官由于尺寸小且结构简单，因此能够培养。类器官与球体的区别在于，球体是对简单结构细胞进行三维培养而成的细胞块，而类器官则是为具备脏器的特定功能而由多个细胞构成的更为复杂的组织。
类器官用于脑、脊髓、肺、肾脏、胃、肠道等各种脏器研究。另外，在癌症研究领域，使用患者的肿瘤细胞制作🍸类器官，将其作为目标模型进行研究。
球体的培养方法
最常见的锻炼技术可称双层锻炼（monolayer culture），肿瘤肿瘤组织核在沟壑的双层上增值能力。而当增值能力的肿瘤肿瘤组织核涉及整锻炼罐体的锻炼户型时，增值能力会犹豫会现实存在碰触应该减缓想象而被应该减缓，或会现实存在肿瘤肿瘤组织核死忙。甚至，犹豫是水平面增值能力，肿瘤肿瘤组织核间的整合率低，没办法演绎菌原料内的工作周围环境。所以，3D锻炼的肿瘤肿瘤组织核是提高在菌原料内的外形实现立体式增值能力。犹豫肿瘤肿瘤组织核间的整合率高，那么应该实现的问题传送，都可以实现将近菌原料内工作周围环境的工作。是因为所诉原由，双层的锻炼肿瘤肿瘤组织核现实存在将会没办法评估报告药品有郊性等的的问题。一般来说，3D培养中会优先选择构成细胞数相近、大小、形状均匀的球体。而且是否可以大量制造也是一个十分重要的条件。
球体的培养方法有🔜三种：用非粘附性培养板摇动培养；利用表面张力使细胞彼此粘附；一边旋转培养室一边培养。下面介绍3🅘种目前广泛使用的培养方法。
- Non-adhesive surface细胞培养法
- 使用非粘附性培养板的培养法。非粘附性培养板是提高了表面亲水性的细胞培养板。滴落在非粘附性培养板上的细胞悬浮在培养基中，细胞彼此粘附形成球体。摇动培养板还可以提高细胞的接触概率。其优点是可以根据培养板的大小一次性培养大量的球体。
- Hanging drop细胞培养法
- 此培养方法将悬浮在培养基的细胞液滴在培养板盖的内侧，培养因表面张力而隆起的液滴。在重力作用下细胞向下聚集，细胞相互粘附来培养球体。其优点是易于保持单个球体中的含有细胞数一致。
- Rotary细胞培养法
- 通过旋转培养室来培养球体的方法。旋转让悬浮状态的细胞均匀地彼此接触，因此可以制造细胞数和大小都相对均等的球体。由于此方法能够大量培养制作球体而备受瞩目。
球体的观察事例
在之下样例中，实施基恩士内置式化荧光显微三维成像系統BZ-X800，对根据乳白色化实验试剂Scale实施乳白色治理 的HEK293球体实施观察植物。死血细胞膜发来红光，不菲察植物不同的情况下的死血细胞膜遍布及增减。 回收利用BZ款型的薄片基本功能，但是观察植物有高度的打样定制时也并不受底色反射光的印象。
假设获批集成化荧光显微成相模式BZ-X800
- 无需暗室且采用全电动控制，可大幅缩短操作时间。
- 采用基恩士自主开发的切片技术，对厚度方向也能进行全幅对焦拍摄，获取轻松获取图像。
- 充分考虑激发光对细胞和荧光试剂的影响，无需担心淬灭，可以掌握整体图像。
- 除了全幅对焦图像外，还可根据Z方向的移动间距信息构建高精细的3D图像。可清晰观察Z方向的定位。
